在生物實(shí)驗(yàn)室里，污染總是來(lái)的防不勝防，悄無(wú)聲息，假陽(yáng)性結(jié)果讓無(wú)數(shù)實(shí)驗(yàn)室人員抓狂和崩潰。如何避免實(shí)驗(yàn)室污染是頭等大事。生物實(shí)驗(yàn)大多數(shù)是微觀的，基于細(xì)胞，分子，蛋白水平。而這些微觀樣本對(duì)外界環(huán)境的影響敏感，環(huán)境中的“雜質(zhì)”亂入，如樣本污染、試劑儀器交叉污染、產(chǎn)物氣溶膠污染等，會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)負(fù)面影響。

       首先，我們要了解常見(jiàn)污染源有哪些？
       ? 樣本交叉污染? 試劑儀器交叉污染? 克隆質(zhì)粒污染? PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染? 氣溶膠污染。
                                                    五步走防止污染
 (一)合理的實(shí)驗(yàn)室分區(qū)
       實(shí)驗(yàn)室內(nèi)各工作區(qū)的實(shí)驗(yàn)用品，包括移液器等應(yīng)專(zhuān)用。如有可能，應(yīng)在裝有紫外燈的層流式工作臺(tái)（如生物安全柜、超凈工作臺(tái)）內(nèi)，吸加PCR試劑，工作臺(tái)內(nèi)應(yīng)放置PCR專(zhuān)業(yè)用的微量離心機(jī)、一次性手套、各量程的移液器和其他必須物品。
 (二)正確的實(shí)驗(yàn)操作
       ①吸加PCR試劑和模板的操作應(yīng)嚴(yán)格按要求進(jìn)行，吸樣要慢，盡量一次性完成，忌多次抽吸，以免交叉污染或產(chǎn)生氣溶膠污染。實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中應(yīng)勤換手套，在進(jìn)出不同區(qū)域或進(jìn)行模板操作后，都應(yīng)及時(shí)更換手套。
        ② 裝有PCR試劑的微量離心管在打開(kāi)之前應(yīng)先做瞬時(shí)離心（約10s），將管壁及管蓋上的液體甩至管底部，從而減少污染手套或加樣器的機(jī)會(huì)。開(kāi)管動(dòng)作要輕，以防管內(nèi)液體濺出或形成氣溶膠，造成污染。
          ③ 在同時(shí)進(jìn)行多個(gè)PCR反應(yīng)時(shí)， 應(yīng)制備主反應(yīng)混合液，再分裝至PCR反應(yīng)管，zui后添加樣品核酸模板，以減少單個(gè)添加操作繁瑣造成的污染。
  (三) 實(shí)驗(yàn)器具和試劑
         ① 實(shí)驗(yàn)室自己配置的試劑，如去離子水、緩沖液等，在使用之前均應(yīng)高壓滅菌或過(guò)濾除菌。
          ② 分裝PCR試劑：所有的PCR試劑都應(yīng) 小量分裝，以減 少重復(fù)取樣次數(shù)，并置于-20℃保存，適當(dāng)時(shí)，最好做到專(zhuān)人專(zhuān)用 。另外，PCR試劑、PCR反應(yīng)液應(yīng)與樣品及PCR產(chǎn)物分開(kāi)保存，不應(yīng)放于同一冰盒或冰箱。
          ③ 所有吸頭、反應(yīng)管等應(yīng)一次性使用，使用之前，都應(yīng)經(jīng)過(guò)高壓處理。若條件允許，最好使用帶濾器的槍頭。

    ④ 各工作區(qū)內(nèi)的移液器要有標(biāo)識(shí)，應(yīng)固定使用用途，不能交叉使用。
(四 ) 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方面應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部 質(zhì)量控制的相關(guān)規(guī)定，實(shí)驗(yàn)中至少應(yīng)：
          ① 設(shè)置目標(biāo)DNA陽(yáng)性對(duì)照反應(yīng)。對(duì)靶序列所作的適當(dāng)?shù)南♂尮ぷ鲬?yīng)于實(shí)驗(yàn)前在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)別的位置進(jìn)行，這樣可防止將靶DNA的濃 溶液帶到實(shí)驗(yàn)室中專(zhuān)門(mén)進(jìn)行PCR的位置。
          ② 設(shè)置PCR試劑陰性對(duì)照和目標(biāo)DNA陰性對(duì)照反應(yīng)。
        實(shí)驗(yàn)室的合理設(shè)計(jì)與建設(shè)是順利進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)和保障，不合理的規(guī)劃設(shè)計(jì)給后期實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行帶來(lái)很多麻煩，從源頭杜絕實(shí)驗(yàn)的麻煩，需要進(jìn)行專(zhuān)業(yè)的學(xué)習(xí)。熙邁檢測(cè)提醒大家，PCR實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)是要有資質(zhì)第三方檢測(cè)公司檢測(cè)，并且提供合格的檢測(cè)報(bào)告，這樣的實(shí)驗(yàn)室才能起到保護(hù)操作人員，樣品的作用！